林木病理学实习指导书

（林学、森林保护专业适用）

河北农业大学林木病理教研室

2012-12-7

2 一、实习时间

8月下旬

二、实习地点

清西陵实验林场

三、实习内容

1、林木病害调查

2、林木病害标本采集和制作

3、林木病害鉴定

四、实习要求

通过本次实习，要求学生能够对在实习基地所遇到的病害的种类、发生的原

因、危害程度和基本防治方法等做出分析；学会病害诊断的一般方法。对所采集

的病害标本，能够通过室内工作，鉴定出病原物的种类。学会病害调查的一般方

法。实习结束时写出实习报告及实习地的病害名录。

五、考核方式

根据实习表现，采集、制作标本情况和实习报告、病害名录等综合记分。

3 项目一 林木病害的调查

森林病害调查分普查和专题调查。普查是调查一定区域内病害种类，分布和受害程度。

如发现重要病害，对其为害程度，和发生发展规律作较详细的调查，就称专题调查。无论普

查还是专题调查，都分为准备、外业和内业三个步骤。

准备工作就是对调查地区作历史地全面地了解 ，内业的结果要求写出调查报告。外业

又分为踏查和标准地调查。普查一般不作标准地调查。

1 森林病害的调查

1.1 踏查

选定几条线路作为踏查路线，沿踏查线路踏查，记载所发现的病害种类，并估计发病程

度。发病程度为轻+、中++、重+++三级记载。

1.2 详细调查

根据踏查结果选定详细调查的主要病害进行详细调查。

1.2.1 确定病害严重程度分级标准

丛枝病分级标准：

级别 分级标准 代表数值 备注

一 无病或几乎无病 0

二 1/3以下侧枝有病 1

三 1/3~2/3侧枝有病 2

四 2/3以上侧枝有病 3

叶部病害病分级标准：

级别 分级标准 代表数值 备注

一 无病或几乎无病 0

二 0-25%以下叶有病 1

三 25-50%叶有病 2

4 四 50-75%以上叶有病 3

五 大于75% 4

干部病害分级标准：

级别 分级标准 代表数值 备注

一 无病或几乎无病 0

二 病斑直径占周长1/3以下 1

三 病斑直径占周长1/3~2/3 2

四 病斑直径占周长2/3以上 3

1.2.2 按林分或病害小区设立标准地 3~5 个， 标准地内包括 50~100 株， 逐株检查其发病程度，

按上述分级标准分别记载，填入下面标准地调查表。

病名____ 树种____

地名____ 标准地号____

林分组成____ 平均直径 ____ 平均高 ____ 密度____ 郁闭度____

病害各级株数

标准地

号 面

积 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ 调查

总株

数 感病

指数 发病

率 备注

按下述公式标准地的发病指数：

100 ） (    



最高一级代表值 调查株数 各级代表值 各级株数 病情指数

2 病情分析

对调查结果进行分析，主要内容包括：病害种类、严重程度、分布情况；分析主要病害

5 发生程度与哪些因素有关。

3 调查报告：（提纲）

1）调查目的

2）调查方法

3）调查结果

① 病害种类、症状描述

② 发病条件的分析

4）结论和讨论

③ 调查结果得出肯定的结论

④ 存在什么不能肯定的问题，应如何进一步研究清楚。

5）防治建议

6 项目二 林木病害标本的采集和制作

林木病害标本和真菌标本是鉴定病害的依据， 是科学研究的资料， 又是陈列展览、 宣传、

教学用的形象用具，因此标本的采集和制作是一件重要的经常性的工作。

1 标本采集

1.1标本采集的主要用具

标本夹、标本箱、刀、锯、移植铲、标本纸、修枝剪、高枝剪、放大镜、标签、记录本

等。

1.2 标本采集时的注意事项

1）真菌病害标本应具有明显的病症，即病部出现的真菌的营养体和繁殖体。为此采集

前应对某些病类的特点和菌类的习性有所了解。锈菌多发生于叶部，子囊壳多在茎、叶、树

皮下或枯叶、枝条上，常仅以孔口外露。

2）对不熟悉的寄主，应尽可能采集其花、芽或果实，尤其是锈病类、黑粉病类的寄主，

以便有助鉴定。

3）每种标本采集的件数不能太少，因制作、鉴定过程中常损坏。

4）干燥易卷缩的标本，最好随采随压，易败坏的果实、肉质的担子果以及黑粉菌、锈

菌、白粉菌类的标本，应分别用纸包好或放入纸袋中，再放入标本箱，以免受损或孢子混杂

污染。

5）标本力求完整，尤其是大型子囊菌、担子菌的子实体。肉质菌类因难以保存其色泽、

形状、采后当天应及时拍照并描述其宏观特征。

6）每份标本，均应挂好采集标签，写明采集号、采集地、采集时间、采集人等，同时

作好必要的采集记录。

表 1 森林病害采集记录表

采集地点------------ 采集号------------日期----------年---------月-----------日

生态环境（立地条件、林分状况-----------------------------------------------------

寄主名称（俗名、学名）-------------------------------------------------------------

受害部位及症状------------------------------------------------------------------------

分布情况受害程度-------------------------------------------------------------------------

病名或病原学名--------------------------------------------------------------------------

鉴定人-----------------------------------采集人------------------------------------------

附注----------------------------------------------------------------------------------------

2 林木病害标本的制作

各类标本应按其性质、用途的不同，用不同的方法处理制作，以备长期使用。最理想的

标本，经过一系列的处理后，仍能保持自然的形体结构与颜色，且能长期保存无损。

2.1标本干燥法

叶片、茎、果等（水分不多，较小型的）可夹于吸水的标本纸或报纸中，用标本夹夹紧，

数天即成。在压制过程中必须勤换干纸。高温高湿的天气，标本易发霉变色，更需勤换纸。

7 通常前三四日每日换纸一二次，以后每二三日换一次，至全部干燥为止。较大枝条和坚果类

病害标本及高等担子菌的革质或木质的子实体可直接晒干、烤干或风干。肉质多水的病害标

本如伞菌子实体，应迅速干燥，最好是直接风吹日晒、烤干或放入烘烤箱中以 30℃-45℃烘

干。制作伞菌或其他肉质菌标本还可以采用以下方法：沿中心纵切成厚约1-1.5mm薄片（观

察菌褶、 菌柄二者关系）， 并把另一部分柄及挖去约 1mm厚的菌盖 （以观察色泽、 外部形态）

贴在涂有明胶或万能胶的薄纸上，按标本形状将四周薄纸剪去，夹在吸水纸中压干，并勤换

纸， 干燥厚贴在台纸上固定即成。 粘菌标本是将基物用万能胶或针固定在纸盒上， 晒干即可。

2.2 标本浸渍法

为了保存某些标本， 如腐烂的水果、 肉质的子囊菌子实体等的色泽、 症状特点、 形状等，

需用此法。

2.2.1 保持绿色的浸渍液

（1）硫酸铜-亚硫酸浸渍法：标本以4%-5%的硫酸铜浸泡 6-24h，再用清水漂洗数小时，

然后放在 1.6%的亚硫酸业中密封瓶口保存。用亚硫酸浸渍液也可把 21g 亚硫酸钠加入

1000ml 水中，溶化后再徐徐加入 16ml 浓硫酸。此法用于保存绿色组织或器官效果很好，但

需注意密封瓶口。必要时可每年换一次浸液。

（2）醋酸铜-甲醛浸渍法：将结晶的醋酸铜加入50%醋酸中至饱和为止。用时以水稀释

3-4 倍（根据标本颜色深浅而定），加热至沸腾，投入标本，煮至标本原有的绿色退去后又变

绿色时取出，用清水漂静后，保存在 5%的甲醛液中。此法保色力很好，但稍带蓝色，与标

本原色稍有出入。过程也较繁琐。

（3）柯里（Colley）浸渍液：（标本浸入此液中密封可永久保存）

醋酸铜 0.2g； 升汞 0.01g； 冰醋酸 0.2ml； 樟脑甘油饱和液 50ml； 水 50ml。

（4）硫酸铜-醋酸浸渍液：（在此种浸渍液中，甲醛和乙醇的用量是根据标本腐烂难易

而定）

硫酸铜 0.2g；醋酸 5ml；甲醛（40%）10ml；乙醇（95%）65ml；水 25ml。

2.2.2 普通防腐性浸渍液主要用于防腐，而不要求保持原色。

（1）5%甲醛液。

（2）70%酒精。

（3）甲醛-酒精液：甲醛（40%） 25ml；酒精（95%） 150ml；水 1000ml。

2.2.3 高等真菌子实体的浸渍液。

（1）硫酸锌-甲醛溶液：硫酸锌 25g； 甲醛（40%） 10ml； 水 1000ml。

（2）亚硫酸液：5%亚硫酸饱和溶液 950ml；酒精 10ml； 水 50ml。

（3）赫斯娄（Hesler） 液：氯化锌 50g；甲醛 （40%） 10ml；甘油 10ml；水 1000ml。

（4）醋酸铅浸渍液：将醋酸铅用蒸馏水制成饱和溶液，但只采用上层溶液。

2.2.4 保存真菌色素不溶于水的浸渍液。

（1）硫酸锌-甲醛溶液：硫酸锌 25g； 甲醛（40%） 10ml； 水 1000ml。

（2）醋酸汞-冰醋酸溶液：醋酸汞 1g； 冰醋酸 5ml； 水 1000ml。

2.2.5 保存真菌色素溶于水的浸渍液。

醋酸汞 1g； 中性醋酸铅 10g； 冰醋酸 10ml； 酒精（95%） 1000ml。

3 标本的整理和保存

制成的标本， 经整理及登记后， 按一定的次序排列和保存。 由于用途和标本性质的不同，

保存的方法也不同。下面介绍几种常用的方法：

8 3.1浸渍标本保存法

浸渍标本可保存于标本瓶中， 为防止标本起浮移动， 也可以将标本缚在玻片上然后浸渍。

浸渍标本应放置于暗处，，以防氧化后变色。浸渍标本瓶必须密封。密封方法如下：

① 暂时封固法：4 份明胶在水中浸数小时，将水滤去，加热溶化，拌入一份石蜡，溶

化混合后成为胶状物，趁热使用。最简单的方法是用凡士林直接涂瓶口，再包硫酸纸。

② 永久封固法：用 28g明胶在水中浸数小时，将水滤去，加热溶化，混入0.324g重各

酸钾及充分的熟石膏使其呈糊状，即可用于封口。

3.2干制标本保存法

① 封套保存标本法，适于叶、小枝、小果病害或小型真菌标本。

用牛皮纸或其他厚纸制成封套， 封套大小可根据需要决定， 一般常用的大小约 10×24cm

或 14×24cm。将标本放入封套中，封套上贴上标本签。这种方法保存方便、节省位置，很

易按照不同的分类系统排列。改变排列方法也比较方便。

② 腊叶标本纸上保存法。用厚的道林纸，剪成一定大小作为台纸。将标本用胶水固定

在台纸上，表面盖上透明纸，并贴上标签放在纸套中保存。这种方法一般情况下很少用。

③ 镜框保存法。根据需要做成带有玻璃盒的纸盒，一般长宽为 30×40cm，厚为 3cm。

底盒铺上一层脱脂棉并加少许樟脑粉，将标本及标签放于其上，然后加上玻璃盖即可。

④ 纸盒保存法。此法适于干制的高等子囊菌和担子菌，以及枝干病害标本。按需要做

成不同大小纸盒或做成带玻璃盖的纸盒，将标本直接放入盒内保存。为防止虫蛀，加少许樟

脑粉，有条件时可在纸盒内放一层棉花后，再放入标本保存。

⑤ 标本瓶保存法。标本瓶洗净干燥后，放入少许樟脑粉或甲醛液，再放入一层脱脂棉，

在脱脂棉上盖一圆纸片，然后将标本放于其上，封盖保存。这种方法很适于教学及陈列用。

标本经整理和鉴定以后，应在封套、纸盒和标本瓶上贴上标签。标签上要注明病名或菌

名、寄主名、采集地点、日期、采集人、鉴定人。

标本可以按寄主或病菌分类系统排列放置， 但这种方法不适宜盒装标本， 因为标本盒大

小不一，数量又不断增加，位置就很难固定或因经常移动标本盒，而使标本损坏。为克服上

述缺点，可将标本盒编成号，分别盒的大小放入标本柜中，然后用两套索引卡片标记：一套

是标本的寄主索引，另一套是菌类索引，也相应地编号以便查找。

标签、标本盒、标本柜的规格，各标本室有所不同，可根据需要自行设计。

9 项目三 林木病害的鉴定

真菌病害的鉴定主要根据病害症状和病原的形态特点

1 病害症状的观察描述

植物感病后，在生理上、组织上和外部形态上产生病变，导致受病部位出现坏死、 腐烂、

畸形等病态，既不正常的表现称之为病状。病部由病原物产生的营养体、繁殖体称为病症。

因病状、病症常在同一部位，故称症状。

植物各种病害的症状都有一定的特点，具有相对的稳定性，根据其主要特征一般可以加以区

别。

观察症状时，要先注意病害对全株的影响，如萎雕、萎缩、畸形，生长习性的改变等，

然后检查病部。观察斑点病害，要注意斑点的形状、数目、大小、色泽、排列和有无轮纹等；

观察腐烂病类，要注意腐烂组织的色、味、干腐或湿腐等。观察要认真、细致、事实求实，

描述要简明准确。

植物病害症状随着病害的发展而变化。初期症状和后期症状常有很大差异。症状的表现

也受周围环境条件的制约，环境条件特殊常出现非典型症状。同一种病害在同一植株的不同

部位发生，症状表现不同，这些都是观察时应注意的。详细的野外观察记载，对鉴定很有帮

助，故应在采集标本时注意作好。

2 病原鉴定

通过临时及半永久玻片的制作，查阅相关资料，对病害病原进行鉴定。

2.1叶面真菌的粘贴检视-----印迹法

病叶表面有明显病症的，如粉层、霉层等常用此法。

在放大镜下选择好病斑或病原物，然后用胶带粘贴或用赛璐珞丙酮液涂抹粘贴（尽量涂

薄）粘贴后，粘有真菌营养体或子实体的胶带小块或赛璐珞薄膜撕下，置于滴有蒸馏水的载

玻片上，以蒸馏水为浮载剂，放上盖玻片即可。

2.2 菌丝体或子实体的挑取检视

寄主表面有明显的病症，如粒状物、粉霜状物、毛状物等，常用接种针挑取，或用刀片

刮取少许（为使病原物容易附着在针或刀片上，接种针或刀片要先沾一点水），制水浮玻片。

此法可用以观察多种叶斑病、锈病、白粉病、煤污病等以及培养基上人工培养的真菌。

2.3 组织透明检视

观察寄主组织内部的病原真菌 （如吸器、 菌丝或子实体）， 可将病叶或病枝据情切成 mm 2

大小的块或及薄的切片， 置于水合氯醛液中， 全部组织透明后， 取出用水冲洗净， 用染液 （苯

胺兰液）染色，用水、甘油或乳酚油作浮载剂制片。

2.4玻片标本制作

利用制片技术将材料制成玻片标本，可用来鉴定病害，研究病原菌细胞的结构和发育，

病原菌的侵入途径，寄主内部受病后解剖状况，病原菌在寄主中的发育状况，以及寄主组织

在解剖上的抗病性和感病性等。所以制片技术对病害病原鉴定极其重要。

10 2.4.1临时玻片标本的制作

擦净载玻片和盖玻片，在载玻片中央滴一滴清水，将目的物（朴树白粉病的有性阶段闭

囊壳）用小镊子挑到水里盖上盖片进行观察。放盖片时用镊子夹住一侧从左到右放下，避免

气泡产生，用纱布或吸水纸吸去多余的水。

也可用透明胶带纸粘取目的物，粘于载玻片上观察。

2.4.2徒手切片的制作

将含有明显目的物的材料剪切成适当大小（5 毫米），用镊子把切好的材料放入通草中

央，左手大拇指与食指握紧通草，右手用刀片轻轻由左上方向右下方拉切，刀刃与通草切口

线平行或相交 45 度角。切下的薄片放在装有清水的培养皿中，挑取目的切片材料。

也可用一小块木板作砧板，用刀片轻轻从左前方向右后方拉切，无论哪种方法，切出薄

而完整的切片材料即可。

2.4.3半永久性玻片标本的制作

经镜检后挑取优良的切片，揭开盖玻片，在酒精灯上烘干水汽（不能烘过头而影响材料

质量），滴上适量的甘油明胶作浮载剂（视材料不同可用甘油、乳酚油等），盖上盖片，盖片

方法同上，避免气泡产生。（如果产生气泡，可稍加热，用口吹气排净气泡）。

干燥后用接种针蘸封固剂于盖片四周（应薄、规整），帖上标签，写明：病原学名、日

期和姓名的小标签帖在玻片左边。

甘油明胶

明胶 5克

甘油 35毫升

水 30毫升

制成的甘油明胶每 100 毫升加苯酚 1 克

2.4.4永久性玻片标本制作（石蜡切片，冷冻切片，电镜切片等）

3 生物绘图

绘林木病害的病原图

11 实习作业

1、病害调查报告及病害名录以小组为单位交；

2、实习报告以个人为单位交。

3、每人交2-3片制好的半永久玻片

4、每人交3-5个林木病原图。