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实验教学 EXPERIMENTAL TEACHING

真菌分类学

真菌分类学实验指导书

(森林保护专业适用)

河北农业大学林木病理教研室

2012年 10月

目 录

实验一 林木病原真菌制片技术

实验二 林木病原真菌基本形态观察

实验三 鞭毛菌亚门真菌的形态观察

实验四 接合菌亚门真菌的形态观察

实验五 子囊菌亚门真菌的形态观察(一)

实验六 子囊菌亚门真菌的形态观察(二)

实验七 子囊菌亚门真菌的形态观察(三)

实验八 担子菌亚门真菌的形态观察

实验九 半知菌亚门真菌的形态观察(一)

实验十 半知菌亚门真菌的形态观察(二)

实验一 林木病原真菌制片技术

症状对鉴定不是绝对可靠,不同的病原物可以产生相似的症状,而一种病害的症状可能

因寄主和环境条件而变化, 因此, 标本的显微镜检查非常重要。 真菌病害标本或培养的真菌,

应因材料的不同而采取不同的方法进行检视。

一、实验目的

通过本实验,掌握不同真菌标本的制片技术。

二、实验内容和方法

(1)菌丝体和子实体的挑取检视

标本或培养基上的菌丝体或子实体,一般是直接用针挑取少许,放在加有一滴浮载剂

的载玻片上,加盖玻片在显微镜下检视。

(2)叶面真菌的粘贴检视

叶面真菌的粘贴检视可用透明胶、醋酸纤维素、火棉胶或其他粘贴剂等。目的是为了

检查叶片表面的真菌如白粉菌和其他霉菌等。

(3)组织整体透明检视

组织透明后的整体检查,不但可以看清表面的病菌,还可以观察组织内部的病菌,透

明的方法很多,最常用的是水合氯醛,其方法是先将小块叶片在等量的酒精(95%)和冰醋

酸的混合液中固定 24h, 然后浸泡在饱和的水合氯醛水溶液中, 待组织透明后取出用水洗净,

经稀苯胺蓝的水溶液染色,用甘油浮载检视。

(4)真菌的玻片培养检视

琼胶培养基表面的真菌,直接挑取检视往往会破坏真菌的结构,故玻片培养是很好的

检视方法。玻片培养又称小培养,小培养法可以随时观察真菌的生长形态(如大分生孢子、

小分生孢子及孢子柄等),还可以随时观察其生长发育的全部情况,有利于菌种的鉴定。

(5)琼胶培养基中真菌的检视

琼胶培养基表面下的真菌机构,可以从平板上切取小块带菌的琼胶培养基、放在载玻

片上,加盖玻片挤压后检视。

(6)徒手切片检视

徒手切片在教学和研究上都很有用,不需要特殊设备,操作方便,是日常用的最多的

真菌检视方法。

作业:每人交两片符合质量要求的玻片标本,并绘制图形。

实验二 林木病原真菌基本形态观察

一、实验目的

了解真菌的一般形态。了解真菌营养体和繁殖体的构造特点。了解各专业术语的涵义。

实验方法:以显微镜检验方法为主,以放大镜和肉眼观察方法为辅。

二、实验内容和方法

1 真菌的营养体

无隔菌丝:毛霉的纯培养。

有隔菌丝:丝核菌的纯培养。

菌索:蜜环菌标本。

菌核:猪茯苓标本。

子座:阔叶树干枯病标本。

2 真菌的繁殖体

1)无性繁殖体。

游动孢子囊和游动孢子:葡萄霜霉病的标本。

孢囊孢子:匐枝根霉(Rhizopus stolonifer)的纯培养。

分生孢子梗与分生孢子:梨黑星病菌(Cercospora cladiastidis)标本。

分生孢子盘与分生孢子:杨棒盘孢菌(Coryneum populinum)标本。

分生孢子器和分生孢子:松球孢壳菌(Sphaeropsis sapinea)标本。

厚垣孢子:镰刀菌的标本。

2)有性繁殖体

接合孢子: 匐枝根霉(Rhizopus stolonifer)玻片标本。

卵孢子:观察谷子白发病玻片标本。

子囊和子囊孢子:盘菌的玻片标本。

担子和担孢子:观察伞菌子实体切片标本。

3)子囊果的观察

子囊腔:观察葡萄座腔菌属(Botryosphaeria)。

闭囊壳:观察阔叶树白粉菌。

子囊壳:观察轮层炭球菌(Daldinia concentrica)子实体标本。

子囊盘: 观察林地上腐生的盘菌。

4)担子果的观察

观察白桦白色杂斑腐朽菌子实体。

作业:绘制菌丝、无性孢子和有性孢子的形态图。

实验三 鞭毛菌亚门真菌的形态观察

一、实验目的

了解鞭毛菌亚门真菌营养体结构和无性繁殖产生的游动孢子的形态。 通过各主要代表的

形态观察,掌握分纲、分目的分类依据,并识别常见鞭毛菌属种的形态特征。

二、实验内容和方法

卵菌纲根据菌体形态、孢子囊萌发的方式(直接萌发还是间接萌发)、有无两游现象、产

果方式(分体产果式或整体产果式)、隔膜有无、卵球数目、游动孢子类型分为四个目:

水霉目 Saprolegniales

水节霉目 Leptomitales

链壶菌目 Lagenidiales

霜霉目 Peronosporales

霜霉目(Peronosporales)

根据孢子囊梗、孢子囊的形态和形成方式、寄生性等条件,本目分为 3 个科,20 属,

约 300 种。

霜霉目分科检索表

1 孢囊梗与菌丝无显著区别,菌丝生于寄主细胞内或细胞间,非严格寄生物……腐霉科

1’孢囊梗与菌丝有显著区别,严格寄生物……………………2

2 孢囊梗以特定的方式分枝,孢子囊生于孢囊梗的顶端、单生…霜霉科

2’孢囊梗棍棒状,不分枝,孢子囊串生,向基性形成…………白锈菌科

1、腐霉科

腐霉属(Pythium):引致幼苗猝倒病、立枯病,为弱寄生菌。孢囊梗与菌丝无区别菌丝

无隔,孢子囊顶生或间生,形态多样,有瓣状、球形和棒形等,游动孢子在泄泡中产生。

疫霉属(Phytophthora):引致马铃薯晚疫病,强寄生。孢囊梗与菌丝有明显的区别,

孢子囊椭圆形或梨形,着生在孢囊梗的顶端,成熟后产生游动孢子,从顶端释放.

2、霜霉科,6 个属

1)圆梗霉属

孢囊梗不分枝,柱状,顶端略膨大,上生小梗,其上着生圆形的孢子囊。

2)指梗霉属(Sclerospora):

孢囊梗上部为重复 2-3 次的二叉分枝,孢子囊梨形。引致谷子白发病

3)单轴霉属(Plasmopara):

孢囊梗分枝处近直角,小枝顶端平截,其上着生梨形孢子囊。引致葡萄霜霉病(P.

viticola)。

4)霜霉属(Peronospora)

孢囊梗二叉状对称分枝,小枝顶端尖锐,孢子囊梨形。引致白菜、油菜霜霉病(P. vetic

ola)。

5)拟霜霉属(Pseudoperonospora)

与霜霉属的区别是孢囊梗分枝不对称。引致黄瓜霜霉病(P. cubensis)。

6)盘梗霉属(Bremia)

孢囊梗叉状对称分枝,顶端膨大成盘状,上生小梗 2-8 个。引致莴苣霜霉病(B. lact

ucae)

3、白锈菌科,1 个属

白锈菌属(Albugo):

孢囊梗棒状,粗短,不分枝,排列成栅栏状。其上产生串生的孢子囊。引致牵牛花白锈

病(A. ipomaeae-panduranae),白菜白锈病(A. candida)(如图)

实验四 接合菌亚门真菌的形态观察

一、实验目的

通过观察匍匐枝、假根、接合孢子、孢子囊、孢囊梗等各种特征,掌握接合菌纲分类依

据,识别常见属的形态特征,并初步对常见类群进行区别和鉴定。

二、实验内容和方法

接合菌亚门分纲检索表

1. 腐生或寄生,寄生的菌丝能侵入寄主组织内;菌体一般较发达………………接合菌纲

1‘ 附生于节肢动物和昆虫的消化道或体表,多以吸盘与寄主相连,菌体较简单…毛菌纲

1)根霉属(Rhizopus)

菌丝无隔,有两种:潜生的营养菌丝和匍匐菌丝,后者呈弓形向四周蔓延,与基质接触

处产生假根,与假根相对处向上长出孢囊梗,顶端形成孢子囊。囊轴为球形或近球形。囊轴

基部有囊托。接合孢子由菌丝体或匍匐丝上生出配子囊,两个同型对生配子囊结合而成,配

囊柄上无附属丝。

2)毛霉属(Mucor)

菌丝体无假根或匍匐丝,分枝很多,孢裹梗直立,分枝,顶生球形孢子囊。

3)犁头霉属

菌丝体似根霉,产生弓形菌丝向四周蔓延,与基物接触点形成假根。与根霉的差异是

孢囊梗散生在匍匐丝中间,与假很不对生。孢囊梗常呈轮状或不规则分枝。顶生孢子囊,大

多为洋梨形。

实验五、六、七 子囊菌亚门真菌的形态观察

一、实验目的

本实验通过对各类真菌代表属的形态观察,了解子囊菌亚门真菌分纲和分目的分类依

据,并识别常见属种。

子囊菌亚门分6个纲:

1.半子囊菌纲:无子囊果,子囊裸生

2.不整囊菌纲:闭囊壳,子囊散生,子囊孢子成熟后子囊壁消解

3.核菌纲:子囊生在有孔口子囊壳内,

或子囊整齐排列在无空口的闭囊壳基部

4.腔菌纲:子囊座,子囊双层壁

5.盘菌纲:子囊盘

6.虫囊菌纲:子囊壳,无菌丝体,均为节肢动物的

外寄生菌

1、半子囊菌纲

外囊菌目(Taphrinales)

1)外囊菌属(Taphrina):寄生性和专化性都强,引

致桃缩叶病(T. deformans)。子囊裸生,排列呈栅

栏状,子囊内有 8 个或更多的孢子(芽殖)。

2、核菌纲(Pyrenomycetes)

子囊果为闭囊壳,子囊在其中规则排列(白粉菌、

小煤炱菌);子囊果为典型的子囊壳(球壳菌目)。

白粉菌目(Erysiphales):闭囊壳。菌丝无色,具特定形态附属丝,子囊孢子单胞。

小煤炱菌目(Meliolales):闭囊壳。菌丝具色,具附属枝,子囊孢子多胞(3-6)。

冠囊菌目(Coronophorale):子囊座,假孔口。

球壳菌目(Sphaeriales):子囊壳,真孔口。

(1)白粉菌目(Erysiphales)

1)单丝壳属

(Sphaerotheca)

子囊一个,附属丝菌丝状。代表:瓜类、豆类白粉病

S.fuligenea。

2)叉丝单囊壳属(Podosphaera):子囊一个,附属丝刚直,顶端多轮二叉状叉状分枝。引

起苹果白粉病 、桃树白粉病 、山楂白粉病。

3)白粉菌属(Erysiphe): 子囊数个,附属丝菌丝状。代表:烟草、芝麻、向日葵白

粉病。

4)球针壳属(Phyllactinia):子囊多个,附属丝针形,基部膨大。代表:梨树白粉病。

5)叉丝壳属(Microphaera):子囊数个,附属丝刚直,顶端叉状分支。代表:核桃白粉、

丁香白粉、榛树白粉病。

6)钩丝壳属(Uncinula): 多个子囊,附属丝顶部呈钩状卷曲。代表:葡萄白粉病 U.necat

or。

7)布氏白粉菌属(Blumeria) 子囊数个,附属丝不发达,短菌丝状。分生孢子梗基部膨大。

代表:禾本科植物白粉病(B.graminis)。

(2)小煤炱目 Meliolales:菌体暗色或灰色。.子囊孢子多胞,2-5,暗色。.不产生任何无性

世代。

1)小煤炱属(Meliola)

菌丝体有附着枝,子囊果为闭囊壳,闭囊壳上有时有刚毛状菌丝,内含几个子囊,每个

子囊内含2-8个子囊孢子,子囊之间无侧丝。子囊孢子长圆形,褐色,具有2-4个隔膜,引起

煤污病。

(3)球壳菌目(Sphaeriales)产生典型的子囊壳。

1)小丛壳属(Glomerella):子囊孢子单胞、无色、椭圆形、略弯。

围小丛壳菌(G. cingulata)危害苹果、杉木、茶、油桐、板栗、葡萄、柿、枇杷等木本植

物的叶片、果实和枝条,引起炭疽病。无性阶段为胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeospor

ioides)

2) 黑腐皮壳属(Valsa)

子囊孢子单胞,腊肠形。如杨树腐烂病菌(V. sordida)、苹果腐烂病菌(V. mali)和

梨腐烂病菌(V. ambiens)

3)长喙壳属(Ceratocystis):子囊壳长颈烧瓶状。子囊孢子单细胞,钢盔形。引致榆树枯

萎病(C. ulmi),栎树枯萎病(C. fagacearum),甘薯黑疤病(C. fimbriala)。

4)内座壳属(Endothia):子座发达,黄色至桔红色。子囊孢子椭圆形,双细胞,分隔处

常缢缩。如引起板栗疫病(干枯病)的寄生内座壳菌(E. parasitica),现已更名为 Cryp

honectria parasitica

5)赤霉属(Gibberella)

子囊壳聚生或散生,子囊孢子 2-3 个隔膜,无色,梭形。 小麦赤霉菌(G. zeae)引起小麦、

玉米赤霉病。藤仓赤霉(G. fujikuroi)能分泌赤霉素,广泛用于促进植物开花、生长及结实。

3、腔菌纲(Loculoascomycetes):子囊果为子囊腔,子囊双层

壁;

1)球腔菌属 Mycosphaerella 子囊座着生在寄主叶片表皮层

下;假囊壳为埋生,球形或扁

圆形,孔口扁平或呈乳头状突起。子囊孢子椭圆形,双胞,

大小相等,无色 。

落叶松球腔菌 M. larici-leptolepis,引起落叶松早期落叶病。

2) 煤炱属(Capnodium):菌丝体绒毛状,由圆形细胞组成,

黑色。子囊座有菌丝状附属丝。子囊孢子多细胞,具有纵横

隔膜,砖隔形。引起柑桔烟煤病(C.citri),柳树烟煤病(C.sal

icinum)。

3) 黑星菌属(Venturia): 子囊座小,初内生,后期

突破寄主表皮而外露, 上部有少数刚毛, 孔口附近较多。

子囊孢子双细胞,常一大一小。引起梨黑星病(V. piri

na)。

4、盘菌纲(Discomycetes):子囊果为子囊盘,杯状或盘状。

1)羊肚菌属(Morchella)

子囊果具有一个蜂窝状的头部和和短柄。包括一些珍贵的食用菌。其中最普通的是羊肚菌

(M.esculenta)和尖顶羊肚菌(M. conica)。

2) 散斑壳属(Lophdermium)

子座梭形,黑色,中间有一纵缝开裂,内含一个子囊盘;子囊棍棒形或圆筒形,子囊孢子丝

状或线形。引起松落针病。

散斑壳属

(a)子囊盘 (b) 子囊和子囊孢子

(a)

(b)

实验八 担子菌亚门真菌的形态观察

一、实验目的

通过对各类真菌代表属的形态观察,了解担子菌亚门真菌分纲和分目的分类依据,并识

别常见属种。

二、实验内容和方法

根据担子果的有无、担子果的开裂类型及担子的有隔或无隔,将担子菌分为三个纲。

1.冬孢菌纲:无担子果,黑粉菌和锈菌。

2.层菌纲:担子果为裸果型或半被果型,大型的真菌。

3.腹菌纲:担子果为被果型,马勃,地星等。

1、冬孢菌纲

(1)锈菌:依据冬孢子特征及其行为(冬孢子是否具柄)分为栅锈菌科、柄锈菌科、半知

锈菌类。

栅锈科:冬孢子无柄

1)栅锈菌属(Melampsora),冬孢子单胞,单层排列,呈栅栏状,侧面壁相互结合,引起

落叶松杨锈病。

2)层锈菌属(Phakopsora),冬孢子单胞,排列成多层。冬孢子堆扁球形,着生在寄主表

皮下,引起枣锈病。

3)柱锈菌属(Cronartium),引起松瘤(栎)锈病和五针松枝干疱锈病;

柄锈科:冬孢子有柄,大多裸露于寄主体外。散生或埋生于胶质物中。

4)单胞锈菌属(Uromyces):冬孢子单胞,近圆形,顶

端有一个发芽孔,光滑或有乳头状突起。冬孢子堆呈黑

色粉状物。引起胡枝子锈病。

5)胶锈菌属(Gymnosporangium),引起苹果锈病和梨

锈病。性孢子器扁球形,生于叶片正面。锈孢子器毛管

状,冬孢子长椭圆形,双细胞,光滑,每个细胞有两个

发芽孔,柄长,遇水膨大。冬孢子堆为鸡冠状。

6)多胞锈属(Phragmidium):冬孢子长椭圆形,多细胞,具长柄,引起蔷薇锈病,玫瑰锈

病。

栅锈菌属

夏孢子和冬孢子 层锈菌属

夏孢子和冬孢子

(2)黑粉菌目(Ustilaginales):一般称作黑粉菌,特征是形成成堆黑色粉状的冬孢子(习惯称

作厚垣孢子)。

1)黑粉菌属(Ustilago): 冬孢子堆常着生于花器上,多数为黑色

或黑褐色粉状物。冬孢子单细胞,萌发后产生有隔的担子,由

2~4 个细胞组成,每个细胞侧生或顶生一个担孢子。

2、层菌纲

1)卷担子属(Helicobasidium):担子果平伏在寄主表面。无

原担子,担子圆柱形,有横隔。危害桑、苹果、梨等植物,引

起紫纹羽病。

2)隔担子菌属(Septobasidium):隔担子菌目,担子果平伏,

蜡质至壳质,近子实层的菌丝产生原担子,由原担子顶部形成

担子,具横隔 4 个细胞。担子果平伏在树皮上,很象贴上膏药,引起膏药病。

3)外担子菌属(Exobasidium): 外担子菌目,无担子果,担子裸生,与外囊菌类似。担子

棍棒状,排列栅栏状,顶生 2-4 个担孢子,单胞,卵圆形。多数寄生在杜鹃花科,也有寄

生在山茶科、樟科等植物上,侵害叶、茎和果实,常常使被害部分发生膨胀肿大的症状。

4)伞菌:

选取一较大的新鲜蘑菇或香菇,用解剖刀或解剖剪将菌盖从菌柄上取下来。

把菌褶朝下平放在白纸或玻璃板上,扣上培养皿或玻璃杯,以免散落的孢子被风吹散。

第二天,拿开玻璃杯和菌盖,就可以看到在白纸或玻璃板上留下与菌褶排列一致的放射

状孢子印。

孢子印是由菌褶上散落下来的孢子组成的。用放大镜观察孢子的大小和颜色。

3、腹菌纲

黑粉菌属

冬孢子和冬孢子萌发

实验九、十 半知菌亚门真菌的形态观察

一、实验目的

本实验通过对各类真菌代表属的形态观察,了解半知菌亚门真菌分纲和分目的分类依

据,并识别常见属种。

二、实验内容和方法

根据真菌形态和产孢方式将半知菌亚门分 3 个纲:

1.芽孢纲 (Blastomycetes ):营养体是单细胞或发育程度不同的菌丝体,产生芽孢子繁殖。

包括酵母菌和类似酵母的真菌。

2. 丝孢纲 (Hyphomycetes): 营养体是发达的菌丝体,分生孢子产生在分生孢子座或分生孢

子梗束上,不产生在分生孢盘或分生孢子器内。

3. 腔孢纲 (Coelomycetes ):分生孢子产生在分生孢子盘或分生孢子器内。

(1)丝孢纲

1)丝核菌属(Rhizoctonia):菌核着生菌丝间,菌丝彼此相连。菌核褐色或黑色,表面粗

糙,内外层颜色一致,结构较疏松。菌丝褐色,近分枝处形成隔膜,呈缢缩状,多为直角分

枝。引起苗木猝到病,如茄丝核菌(R. solani)。

2)小核菌属(Sclerotium):此菌不产生无性孢子,也很少产生有性孢子,菌丝初为白色,

后稍带褐色, 直径 3~9 微米, 后期菌丝可密集在一起, 形成油菜籽状菌核。 引起苗木白绢病,

如齐整小核菌(S. rolfsii)。

3)葡萄孢属(Botrytis):分生孢子梗无色,顶端

细胞膨大成球形,上面有许多小梗,分生孢子着生

于梗上聚集成葡萄穗状。常见的有灰葡萄孢菌(B.

cinerea),引起松树、柿、桉树等多种林木幼苗灰

霉病。

4)曲霉属(Aspergillus):菌丝无色或有色,分生孢子梗顶端膨大成球形,椭圆形,半球

形或棍棒形的泡囊, 从泡囊上产生小梗, 分生孢子串生于小梗顶端或辐射状排列。 大多腐生,

有些种可用于发酵,是重要的工业微生物。如赭曲霉(A. ochraceus)可引起苹果和梨的果

实腐烂。 丝核菌属

(a) 直角状分枝的菌丝 (b) 菌核纠结的菌

(

c

)

(

a

)

(

b

)

小核菌属

(a) 菌核 (b) 部分菌核切片

(

a

)

(

b

)

5)青霉属(Penicillium):菌落有各种各样颜色,绿、黄绿、青绿,灰绿等。如引起柑桔

果实青、绿霉病的意大利青霉(P. italicum)和指状青霉(P. digitatum)。

6)镰刀菌属(Fusarium):如引起苗木猝倒病和油桐枯萎病的尖孢镰刀菌(F. oxysporum)。

(2)腔孢纲

1)炭疽菌属(Colletotrichum)

分生孢子盘 生于寄主植物角质层下、表皮或表皮下,散生

或合生,分生孢子盘上有时出现褐色至暗褐色刚毛;分生

孢子无色单胞,直、短圆柱形或镰刀形。胶孢炭疽菌[C. gl

oeosporioide( Penz.)Sacc. ] 引起多种植物炭疽病。

2)盘多毛孢属(Pestalotia):分生孢子梗无色,丝状。分

生孢子纺锤形,4 个分隔,5 个细胞,中间 3个细胞黄褐色

或暗褐色, 两端细胞小而无色, 顶端细胞生有3~5 根刺毛,

无色。引起松针赤枯病(P. funerea)。

3)痂圆孢属(Sphaceloma):分生孢子梗密集, 不分枝,由分生孢子座上长, 孢子小, 单胞,

无色, 卵圆形, 椭圆形, 引起疮痂病。 引起柑桔疮痂病、葡萄黑豆病和泡桐黑痘病菌。

4)盘二孢属(Marssonia): 分生孢子非常小, 孢子双胞, 大小不等, 无色, 卵圆形或椭圆形。

苹果盘二孢引起苹果褐斑病、杨树盘二孢引起杨树黑斑病。

曲霉属

分生孢子梗和分生孢子 图2-53 镰孢属

(a) 大型分生孢子 (b) 菌丝和分生孢子梗

(

a

(

b

(

c

炭疽菌属

分生孢子器和分生孢子

5)大茎点属(Macrophoma):分生孢子长度大于 15 µm。引起梨和苹果轮纹病(M. kawa

tsukai)。

6)茎点霉属(Phoma):分生孢子梗极短;分生孢子长度小于 15 µm,寄生性弱,侵染茎杆、

果实,病斑边缘界线不明显。引起桉树溃疡病(P. eucalyptica)

7)拟茎点属(Phomopsis):分生孢子有两种类型:一种为卵圆形,单胞,能萌发;另一种

为线形,一端弯曲成钩状,不能萌发。引起柑桔树脂病(又称流胶病)(P. citri)

8)叶点霉属(Phyllosticta)

形态与茎点霉属相似,寄生性较强,主要危害叶片引起叶斑病,病斑边缘界线明显。梨叶点

霉引起梨、苹果叶斑病。

9)壳囊孢属(Cytospora):分生孢子器着生在子座内,不规则的分为数室,但有共同长喙

状孔口,分生孢子香蕉形。

10)壳针孢属(Septoria):分生孢子无色,线形,多隔膜。杨壳针孢[S. populi]引起杨叶斑病。

茎点霉属

分生孢子器和分生孢子

叶点霉属

分生孢子器和分生孢子

壳针孢属

分生孢子器和分生孢子

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